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如何完善ELISA？
日期：2025-12-06 18:47
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摘要：1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進行探測，并測量產生的信號。
穩健的洗滌技術是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優化洗滌步驟的數量、持續時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結果的未結合試劑至關重要。為了獲得更一致的ELISA數據。
2.注意標準曲線
標準曲線對于獲得定量ELISA結果至關重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產它的參考材料必須是高質量的，并且有足夠的數量，以在分析的整個生命周期內實現可重復的性能。
ELISA數據通常以相對于測定讀數的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學發光。在標準曲線范圍內使用更多點（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應范圍內更好地定義曲線以改進擬合。
3.確保可重復性和準確性
可重復性和準確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當定量ELISA 數據用于推動關鍵決策時，要求可能特別嚴格。
ELISA是一種免疫測定。免疫測定(immunoassay, IA) 是應用免疫學技術測定標本的方法。在檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。那么如何完善ELISA？
1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進行探測，并測量產生的信號。穩健的洗滌技術是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優化洗滌步驟的數量、持續時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結果的未結合試劑至關重要。為了獲得更一致的ELISA數據。
2.注意標準曲線
標準曲線對于獲得定量ELISA結果至關重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產它的參考材料必須是高質量的，并且有足夠的數量，以在分析的整個生命周期內實現可重復的性能。ELISA數據通常以相對于測定讀數的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學發光。在標準曲線范圍內使用更多點（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應范圍內更好地定義曲線以改進擬合。
3.確保可重復性和準確性
可重復性和準確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當定量ELISA 數據用于推動關鍵決策時，要求可能特別嚴格。為了額外保證檢測間的重現性，添加另一個內部對照來補充標準曲線可提供更大的結果可信度。作為一般規則，重復讀數的變異系數 (CV) 不應超過 20%。
1.選擇適合您需求的ELISA方法
ELISA可以通過多種方式進行配置，所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面，用抗體進行探測，并測量產生的信號。穩健的洗滌技術是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優化洗滌步驟的數量、持續時間和體積，以及洗滌緩沖液的去污劑濃度，對于確保去除任何可能影響結果的未結合試劑至關重要。為了獲得更一致的ELISA數據。
2.注意標準曲線
標準曲線對于獲得定量ELISA結果至關重要，因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因，用于生產它的參考材料必須是高質量的，并且有足夠的數量，以在分析的整個生命周期內實現可重復的性能。ELISA數據通常以相對于測定讀數的分析物濃度表示，可以是比色，熒光或化學發光。在標準曲線范圍內使用更多點（理想情況下為8個或更多）提供了消除異常值的靈活性，并在信號響應范圍內更好地定義曲線以改進擬合。
3.確保可重復性和準確性
可重復性和準確性對于任何免疫測定都是必不可少的，但當定量ELISA 數據用于推動關鍵決策時，要求可能特別嚴格。為了額外保證檢測間的重現性，添加另一個內部對照來補充標準曲線可提供更大的結果可信度。作為一般規則，重復讀數的變異系數 (CV) 不應超過 20%。